Warum sollten Blasen in einem Western Blot vermieden werden?

Warum sollten Blasen in einem Western Blot vermieden werden?
Anonim

Antworten:

um einen ordnungsgemäßen Transfer des Proteins auf die Western Blot-Membran zu ermöglichen

Erläuterung:

Sobald die SDS-PAGE abgeschlossen ist, wird das Gel aus dem Gipsverband entfernt und dann wie in der Abbildung gezeigt ein Western-Blot-Setup durchgeführt. Sobald das Setup abgeschlossen ist, wird die elektrische Ladung mit Proteingel auf der negativen Seite und der Membran auf der positiven Seite aufgebracht. Sobald dieser Aufbau abgeschlossen ist, werden die Proteine aufgrund des angelegten elektrischen Feldes auf die Membran übertragen.

Da ein konstantes elektrisches Feld angelegt wird, können die Bläschen, wenn sich die Blasen zwischen Gel und Membran bewegen, aus folgenden Gründen nicht auf die Membran übertragen

  1. Es gibt eine Lücke zwischen der Membran und dem Gel, wo sich eine Blase befindet. Sie wird kein elektrisches Feld aufrechterhalten können, da das elektrische Feld in einer Hohlkugel Null ist, was hier unsere Luftblase ist.

Da für die Übertragung von Proteinen zur Membran ein elektrisches Feld erforderlich ist, ist aufgrund der Luftblase kein elektrisches Feld vorhanden, also kein Proteintransfer

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