Was ist SDS-PAGE von Proteinen?

Was ist SDS-PAGE von Proteinen?
Anonim

Antworten:

Es ist die Trennung von Proteinen basierend auf ihrem Molekulargewicht.

Erläuterung:

SDS-PAGE ist die Trennung von Proteinen in einem elektrischen Feld, basierend auf ihrem Molekulargewicht.

Die Proteine werden durch Erhitzen auf zwischen 70 und 100 ° C in Gegenwart von Verbindungen wie 2-Mercaptoethanol oder Dithiothreitol und SDS (Natriumdodecylsulfat) denaturiert. Das Mercaptoethanol oder Dithiothreitol bricht die Disulfidbindungen im Protein und bewirkt, dass sich dieses entfaltet und linear wird (wie eine lange Schnur ohne Falten). Das SDS wird den Entfaltungsprozess unterstützen und das Protein in einer negativen Ladung abdecken.

Die Mischung wird dann auf ein Polyacrylamidgel (das PAGE-Bit in SDS-PAGE) aufgetragen und ein elektrischer Strom angelegt. Die negativ geladenen Proteine bewegen sich im elektrischen Feld. Die PAGE verhindert, dass sich größere Proteine im Vergleich zu den kleinen Proteinen sehr schnell bewegen (die PAGE wirkt wie ein Sieb). Das Ergebnis ist, dass die großen Proteine in der Nähe des Gel-Starts bleiben, während sich die kleinen Proteine weiter in die PAGE bewegt haben.

Sie können SDS-PAGE in Betrieb im folgenden Video sehen: