Warum werden Restriktionsenzyme in 50% iger Glycerinlösung aufbewahrt?

Warum werden Restriktionsenzyme in 50% iger Glycerinlösung aufbewahrt?
Anonim

Antworten:

Um sie intakt zu halten …

Erläuterung:

Restriktionsenzyme werden in sehr kleinen Mengen verwendet, werden jedoch normalerweise in etwas größeren Chargen gekauft.

Wenn nicht anders, ziehen Sie es vor, verschiedene Tests mit derselben Charge durchzuführen. Die gekaufte Charge muss daher längere Zeit gelagert werden.

Die meisten Enzyme sind in ihrem Puffer bei 4 Grad Celsius für eine Weile vollkommen glücklich, werden aber schließlich abgebaut. 24 Stunden ist normalerweise das akzeptierte Limit.

Für eine längere Lagerung muss die Charge eingefroren werden. -20C ist der Standard und hält ihn mehrere Monate lang. Für noch längere Zeiträume (z. B. ein oder mehrere Jahre) ist -70 ° C die Norm.

Es ist notwendig, es schnell einzufrieren und in kleinen Behältern (z. B. Eppendorfs), um ein zu häufiges Auftauen / Wiedereinfrieren zu vermeiden.

Um eine Schädigung des Proteins bei so niedrigen Temperaturen zu vermeiden, können / sollten Stabilisatoren zugesetzt werden, wie DTT (Di-Thio-Treitol), Serumalbumin und vor allem Glycerol (5-50%).

Seltsamerweise ist es notwendig, bei -20 ° C 50% iges Glycerol zu verwenden, wohingegen bei -70 Glycerol nicht wirklich notwendig ist. Die Zugabe von Glycerol kann jedoch zur Stabilisierung des Proteins beitragen.