Warum ist es so wichtig, dass dasselbe Restriktionsenzym verwendet wird, um die DNA beider Organismen zu spalten (zu schneiden), die zur Erzeugung eines transgenen Organismus verwendet werden?

Warum ist es so wichtig, dass dasselbe Restriktionsenzym verwendet wird, um die DNA beider Organismen zu spalten (zu schneiden), die zur Erzeugung eines transgenen Organismus verwendet werden?
Anonim

Antworten:

Siehe unten…

Erläuterung:

Restriktionsenzyme werden an bestimmten Sequenzen geschnitten, sodass dasselbe Restriktionsenzym verwendet werden muss, da es Fragmente mit den gleichen komplementären klebrigen Enden produziert, so dass sich Bindungen zwischen ihnen bilden können.

Es gibt bestimmte kompatible Restriktionsstellen, die zusammen verwendet werden können. Xho1 und Sal1 sind Beispiele. Ihre klebrigen Enden passen zusammen, und so können sie miteinander verbunden werden. Die Ligation tötet jedoch sowohl die Xho1- als auch die Sal1-Site, sodass Sie keine dieser Methoden zum erneuten Schneiden verwenden können (an den Ligation-Standorten).

Sie können auch Exonuclease oder PCR verwenden, um die meisten klebrigen Enden zu erreichen (5 oder 3 Überlappungen) an stumpfen Stellen - auf diese Weise können Sie in stumpfe Schnittstellen ligieren - dies wird jedoch im Allgemeinen auch die stumpfe Stelle abtöten.