Antworten:
Das hängt von der Art des ELISA-Tests ab.
Erläuterung:
ELISA = Enzyme Linked Immunosorbent Assay.
Es gibt verschiedene Arten von ELISA-Assays. Was Sie brauchen, ist:
- Antikörper mit einem daran gebundenen Enzym
- Antigen, an das der Antikörper bindet
- Substrat des Enzyms, das eine messbare Reaktion verursacht
Das Enzym An den Antikörper gebunden ist häufig HRP (Meerrettichperoxidase). HRP kann mit verschiedenen Substraten reagieren, die entweder die Farbe ändern oder Licht abgeben, beide messbar.
Das Bild zeigt eine Übersicht der verschiedene Typen von ELISA-Assays. Ich werde unten erklären, wie sie funktionieren.
Direkter ELISA
Eine Platte wird mit dem Antigen (Ag) beschichtet und a primärer Antikörper mit Enzym wird zugegeben. Wenn das Substrat zugegeben wird, tritt die Reaktion auf und ist proportional zu der Menge Antikörper-Antigen-Wechselwirkungen.
Indirekter ELISA
Wieder wird eine Platte mit dem Antigen beschichtet und a primärer Antikörper bindet an das Antigen. EIN Sekundärantikörper wird hinzugefügt, der an den ersten Antikörper bindet. Der 2. Antikörper enthält das Enzym, das mit dem Substrat reagiert.
Sandwich-ELISA
Hier sind zwei oder drei Antikörper beteiligt. Ein Capture-Antikörper ist an Platten gebunden und bindet an das Antigen. Es folgen die gleichen Schritte wie bei der direkten (nur ein Antikörper) oder der indirekten Methode (zwei Antikörper).
Kompetitiver ELISA
Manchmal als Inhibitions-ELISA bezeichnet, ist dies etwas komplizierter. Eine Platte wird mit dem zu untersuchenden Antigen beschichtet. EIN primärer Antikörper mit Enzym wird zunächst mit einer Probe mit unbekannter Konzentration des gleichen Antigens inkubiert. Diese wird dann auf die Platte gegeben, so dass die noch freien Antikörper mit dem Antigen auf der Platte reagieren können. Nachdem die Antikörper-Antigen-Komplexe der Probe abgewaschen wurden, wird das Substrat zugegeben.
Wenn die unbekannte Probe viel Antigen enthält, ist weniger Antikörper frei, um an die Platte zu binden = niedrigeres Signal.
Was sind die erwarteten Verklumpungsergebnisse, wenn jede Blutsorte mit jedem Antikörper gemischt wird? Die Antikörper sind Anti-A, Anti-B und Anti-Rh. Woher weiß ich, ob die verschiedenen Blutgruppen (A +, A-, B +, B- usw.) mit einem der Antikörper klumpen?
Eine Agglutination (Verklumpung) tritt auf, wenn Blut, das das bestimmte Antigen enthält, mit dem jeweiligen Antikörper gemischt wird. Die Agglutination von Blutgruppen erfolgt wie folgt: A + - Agglutination mit Anti-A und Anti-Rh. Keine Agglutination mit Anti-B. A- Agglutination mit Anti-A. Keine Agglutination mit Anti-B und Anti-Rh. B + - Agglutination mit Anti-B und Anti-Rh. Keine Agglutination mit Anti-A. B- Agglutination mit Anti-B. Keine Agglutination mit Anti-B und Anti-Rh. AB + - Agglutination mit Anti-A, Anti-B und Anti-Rh. AB- Agglutination mit Anti-A und Anti-B. Keine Agglutination mit Anti-Rh. O + - A
Was ist der Unterschied zwischen Antikörper-Capture-ELISA und Sandwich-ELISA?
Soweit ich weiß (und ich bin dazu bereit, das zu korrigieren), gibt es keinen Unterschied. Soweit ich weiß, sind "ELISAs" für "Antikörper-Capture" und "Sandwich" gleich. In beiden Fällen wird ein "Capture" -Antikörper vor der Zugabe der Probe auf die ELISA-Platte aufgetragen (freie Bindungsstellen sind blockiert). Das Antigen in der Probe bindet an den "Capture" -Antikörper, und dann wird jegliches ungebundene Material weggespült. Durch die Verwendung eines "Capture" -Antikörpers erhöhen Sie effektiv die zur Detekt
Wann stellt Ihr Körper Antikörper her? Was aktiviert den Körper zur Herstellung von Antikörpern oder werden diese ständig produziert?
Der Körper produziert während einer Immunantwort Antikörper. Antikörper werden nicht ständig produziert. Ihre Produktion beginnt während einer Immunantwort. T-Lymphozyten interagieren mit dem Antigen eines Erregers, typischerweise im Blut. Sie reifen entweder zu Killerzellen, die den Erreger zu zerstören beginnen, oder Helferzellen, die Zytokine produzieren, die auf B-Lymphozyten hinweisen. Wenn sie das Signal empfangen, reifen sie zu Plasmazellen und beginnen, Antikörper zu produzieren. Sie sind spezifisch für das Antigen des Erregers und können es angreifen und zerstö